Informacja

Drogi użytkowniku, aplikacja do prawidłowego działania wymaga obsługi JavaScript. Proszę włącz obsługę JavaScript w Twojej przeglądarce.

Tytuł pozycji:

Closed-tube genotyping of apolipoprotein E by isolated-probe PCR with multiple unlabeled probes and high-resolution DNA melting analysis

Tytuł:
Closed-tube genotyping of apolipoprotein E by isolated-probe PCR with multiple unlabeled probes and high-resolution DNA melting analysis
Autorzy:
Matthew Dean Poulson
Carl T. Wittwer
Temat:
Biology (General)
QH301-705.5
Źródło:
BioTechniques, Vol 43, Iss 1, Pp 87-91 (2007)
Wydawca:
Future Science Ltd, 2007.
Rok publikacji:
2007
Kolekcja:
LCC:Biology (General)
Typ dokumentu:
article
Opis pliku:
electronic resource
Język:
English
ISSN:
1940-9818
0736-6205
Relacje:
https://doaj.org/toc/0736-6205; https://doaj.org/toc/1940-9818
DOI:
10.2144/000112459
Dostęp URL:
https://doaj.org/article/208d94576d4b4d92bf68d9de6efde5db  Link otwiera się w nowym oknie
Numer akcesji:
edsdoj.208d94576d4b4d92bf68d9de6efde5db
Czasopismo naukowe
Isolated-probe PCR (IP-PCR) is a method that combines asymmetric PCR, unlabeled probes, and high-resolution DNA melting while maintaining a closed tube system. A double-stranded DNA (dsDNA) dye LCGreen® I was used to detect the unlabeled probes. LCGreen I is also used to detect the 277-base pair PCR product peak as an internal amplification control. To accomplish this, IP-PCR separates the asymmetric PCR amplification step and the detection step of the unlabeled probes. This prevents the probes from interfering with the amplification of the DNA target. The samples are then melted using a high-resolution DNA melting instrument: the HR-I™. The closed tube system virtually eliminates PCR product contamination or sample carryover. The target apolipoprotein E (APOE) was chosen to test the IP-PCR technique. APOE contains two single nucleotide polymorphisms (SNPs) located 139 base pairs apart in a GC-rich region of the human genome. The results from this study show that the IP-PCR technique was able to determine the correct APOE genotype for each of the 101 samples. The IP-PCR technique should also be useful in detecting SNPs in other high-GC regions of the human genome.

Ta witryna wykorzystuje pliki cookies do przechowywania informacji na Twoim komputerze. Pliki cookies stosujemy w celu świadczenia usług na najwyższym poziomie, w tym w sposób dostosowany do indywidualnych potrzeb. Korzystanie z witryny bez zmiany ustawień dotyczących cookies oznacza, że będą one zamieszczane w Twoim komputerze. W każdym momencie możesz dokonać zmiany ustawień dotyczących cookies